Biologie Genetik – Gentechnik und CRISPR
Karteikarten zum Thema „Naturwissenschaften“ · 15 Karten · von atrio. Beispiele: Was ist die Funktion der PAM-Sequenz bei CRISPR-Cas9? · Welche zwei RNA-Komp…
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15 KartenWas ist die Funktion der PAM-Sequenz bei CRISPR-Cas9?
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Die PAM-Sequenz (z. B. NGG) wird von Cas9 erkannt und ist Voraussetzung für die Bindung und Spaltung der Ziel-DNA.
Welche zwei RNA-Komponenten bilden die funktionale guide-RNA (gRNA)?
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crRNA (zielspezifisch) und tracrRNA (Scaffold für Cas9-Bindung) werden oft zu einer synthetischen sgRNA fusioniert.
Welche DNA-Reparaturwege nutzen Zellen nach einem CRISPR-Cas9-Doppelstrangbruch?
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Nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ, fehleranfällig) und homologe Rekombination (HDR, präzise mit Donor-Template).
Wozu dienen Restriktionsenzyme in der klassischen Gentechnik?
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Sie schneiden DNA an spezifischen Erkennungssequenzen und erzeugen kompatible Enden für Ligation in Vektoren.
Was versteht man unter einem Expressionsvektor?
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Ein Plasmid oder Virus, das Promotor, Selektionsmarker und Klonierungsstelle enthält, um ein Gen im Wirt zu exprimieren.
Welche Rolle spielt der Selektionsmarker (z. B. Antibiotikaresistenz) bei der Transformation?
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Er ermöglicht die Selektion erfolgreich transformierter Zellen durch Überleben auf Antibiotika-haltigem Medium.
Was ist der Unterschied zwischen Knock-out und Knock-in bei Genomeditierung?
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Knock-out inaktiviert ein Gen (meist via NHEJ), Knock-in fügt eine definierte Sequenz ein (via HDR mit Donor-DNA).
Wie funktioniert die PCR-basierte Site-directed Mutagenese?
Rückseite
Mutagenische Primer introduzieren gezielte Basenänderungen während der Amplifikation; das methylierte Template wird anschließend durch DpnI abgebaut.
Was ist ein transgenes Organismus?
Rückseite
Ein Organismus, in dessen Keimbahn fremde DNA (Transgen) stabil integriert und vererbt wird.
Welche Methode eignet sich zur Erzeugung genetisch identischer Organismen (Klonen)?
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Kerntransfer (SCNT): Übertragung eines somatischen Zellkerns in eine enukleierte Oozyte, Entwicklung zum Individuum.
Was beschreibt der Begriff 'Off-Target-Effekt' bei CRISPR?
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Unbeabsichtigte DNA-Spaltungen an genomischen Stellen mit Sequenzähnlichkeit zur Zielsequenz.
Wie kann man Off-Target-Effekte experimentell minimieren?
Rückseite
Verwendung von High-Fidelity-Cas9-Varianten, optimierte gRNA-Designs, kurze Inkubationszeiten oder RNP-Transfektion.
Wofür steht die Abkürzung TALEN und wie unterscheidet es sich von CRISPR?
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Transcription Activator-Like Effector Nuclease: Protein-basierte DNA-Bindung (modular), aufwendiger als RNA-gesteuertes CRISPR.
Was regelt das deutsche Gentechnikgesetz (GenTG) bezüglich Freisetzungen?
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Freisetzungen gentechnisch veränderter Organismen (GVO) bedürfen Genehmigung, Risikoprüfung und Überwachung nach Stufen (S1–S4).
Welche Anwendung hat CRISPR-basierte Gen-Drive-Technologie?
Rückseite
Durchsetzung eines Allels in Populationen (z. B. Mücken) via homologe Rekombination im Keimbahn-Erbgut – ökologisch risikoreich.